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夾心ELISA vs 競爭性ELISA:兩種ELISA技術(shù)的比較

發(fā)布時間:2024-09-09     發(fā)布作者:上海通蔚生物

  ELISA,全稱酶聯(lián)免疫吸附測定(Enzyme-LinkedImmunosorbentAssay)。在生物學(xué)免疫實驗方法中常見的技術(shù)。這種技術(shù)廣泛應(yīng)用于生物學(xué)、醫(yī)學(xué)、食品安全、環(huán)境檢測和藥物帥選等領(lǐng)域。

  ELISA基本原理是將抗原或抗體吸附在固相載體上,通過酶標(biāo)記的抗原抗體反應(yīng)進(jìn)行檢測。那么,elisa有哪些主要類型呢?

  在酶聯(lián)吸附測定實驗中,elisa主要類型有直接ELISA、間接ELISA、競爭ELISA和夾心ELISA。比較常用的是夾心ELISA和競爭ELISA。上海通蔚針對這兩種類型重點為大家介紹下區(qū)別。如果你想了解ELISA其它類型,可以參考《elisa試劑盒有哪幾種類型?elisa四類型圖解》。

  Elisa夾心法


  Elisa夾心法是將特異性抗體結(jié)合到固相載體上形成固相抗體(捕獲抗體),然后和待檢樣本中的相應(yīng)抗原結(jié)合形成免疫復(fù)合物,洗滌后再加酶標(biāo)記抗體(檢測抗體),與免疫復(fù)合物中抗原結(jié)合形成酶標(biāo)抗體—抗原—固相抗體復(fù)合物,加底物顯色,判斷抗原含量。整個過程中,待檢抗原經(jīng)過捕獲抗體和檢測抗體雙重篩選,具有高特異性。


  Elisa夾心法的優(yōu)點是特異性高、靈敏度高,但其主要缺點是捕獲抗體和檢測抗體之間存在相互作用。

  Elisa競爭法


  ELISA競爭法預(yù)先將抗原包被在固相載體上,并加入酶標(biāo)記的特異性抗體,實驗時,加入待檢抗原(或抗體),如果待檢物是抗原,則待檢抗原于預(yù)先包被在固相載體上的抗原競爭結(jié)合酶標(biāo)抗體,如果待檢測物是抗體,則待檢抗體就與系統(tǒng)中原有的酶標(biāo)抗體競爭結(jié)合包被在固相載體上的抗原,通過洗滌洗掉被競爭結(jié)合的酶標(biāo)抗體,最后加底物顯色,需要注意的是顯色結(jié)果與待檢抗原(或抗體)的量成反比。


  Elisa競爭法的優(yōu)點是適合檢測小抗原,適合檢測復(fù)雜樣品,特異性高,靈敏度高。但是,它有一些缺點,例如每次ELISA都需要標(biāo)記抗體,這可能導(dǎo)致抗體失活,隨著靶抗原的增加信號會降低。

  Elisa實驗選擇夾心法還是競爭法?


  1.根據(jù)待測物質(zhì)的大?。喝舸郎y物質(zhì)為大分子抗原,如蛋白質(zhì)、多糖等,建議選擇夾心法;若待測物質(zhì)為小分子抗原或抗體,則競爭法可能更為合適。

  2.根據(jù)實驗需求:若需要高靈敏度的檢測,夾心法通常是更好的選擇;若需要進(jìn)行定量或半定量檢測,競爭法則可能更適合。

  3.考慮實驗操作的復(fù)雜性:夾心法相對復(fù)雜,需要兩種特異性抗體;而競爭法則相對簡單,但可能需要在實驗設(shè)計和數(shù)據(jù)分析上投入更多精力。

  上述通蔚生物為大家介紹這兩種ELISA類型的區(qū)別,作為實驗室較為常用的酶聯(lián)技術(shù),它們有各自特點。具體使用方法結(jié)合實驗需求及檢測物質(zhì)大小來確定。如果您還有關(guān)于這兩種類型ELISA其它問題,歡迎前來咨詢。


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