ELISA試劑盒試驗中為了確定*佳信號和*背景應(yīng)將捕獲抗體(0.5-4μg/ml)和檢測抗體(0.25-2μg/ml)在預(yù)試驗中進行互相相抗的滴定。同時，應(yīng)包含在適當規(guī)模內(nèi)的規(guī)范品的系列稀釋。按試劑說明書慣例提供的規(guī)模進行操作。

一般待測抗原規(guī)范曲線的線性規(guī)模的可通過將規(guī)范品做8次2倍系列稀釋從2000pg/ml到15pg/ml。可利用規(guī)范的ELISA操作流程、擴大試劑盒、第三類試劑、或改動酶底物體系可在一定規(guī)模內(nèi)進步靈敏度。為了優(yōu)化靈敏度，主張孵育規(guī)范品和標本。若使用過氧化物酶作為顯色體系，應(yīng)禁止在洗液和稀釋液中加疊氮鈉，疊氮鈉可抑制過氧化物ELISA試劑盒酶的活性。