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021-54845833/15800441009
細(xì)胞基本信息
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名 稱 |
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貨 號 |
TW-CC3480
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品 牌 |
通蔚生物 |
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細(xì)胞規(guī)格 |
100μl |
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儲 存 |
-20℃ |
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菌株抗性 |
無抗 |
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培養(yǎng)基 |
YPDA |
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菌株類別 |
酵母菌 |
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培養(yǎng)條件 |
28℃，有氧，YPDA |
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基因型 |
MATahisΔ200trp1-901leu2-3,112ade2LYS2::(lexAop)4-HIS3ura3::(lexAop)8-lacZ ade2::(lexAop) 8-ADE2 GAL4 |
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質(zhì)粒轉(zhuǎn)化 |
電轉(zhuǎn) |
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保存方式 |
30%甘油，-20℃ |
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基本應(yīng)用 |
酵母雙雜交 |
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菌株簡介 |
DUALmembrane系統(tǒng)是DUALsystems BioTech公司開發(fā)的專門篩選跨膜蛋白間相互作用的檢測技術(shù)，它利用分離的泛素系統(tǒng)（split-ubiquitin）直接檢測天然狀態(tài)下膜蛋白間的相互作用，是目前市面上唯一檢測膜蛋白間相互作用的酵母雙雜系統(tǒng)。此系統(tǒng)采用NMY51酵母菌株，可直接轉(zhuǎn)化質(zhì)粒進(jìn)行蛋白互作驗證或篩庫試驗；此菌株Transformation marker為: trp1, leu2-3，報告基因為：HIS3, ADE2 和 lacZ，第一步通過營養(yǎng)缺陷型報告基因（HIS3, ADE2）進(jìn)行選擇性生長篩選，進(jìn)一步通過 LacZ 報告基因進(jìn)行β-半乳糖分析顯色的定量或半定量篩選，三個獨立的報告基因，受不同啟動子的調(diào)控，降低假陽性幾率。原理：泛素（ubiquitin）分子量很小，由 76aa 殘基組成；泛素作為降解信號分子，可以連接另外一種蛋白質(zhì)的 N 端，然后被泛素專一性蛋白酶（UBPs）識別，從而導(dǎo)致與泛素相連的蛋白被酶解。泛素可以人為分成兩部分：N 端（Nub），C 端（Cub）。首先，人為地將泛素 Nub 的 3 位異亮氨酸突變?yōu)楦拾彼幔∟ubI 突變?yōu)?NubG）。這樣與 Cub 的親合力大大降低，避免了 Cub 和 Nub 自我結(jié)合或接近的可能性。其次，將Cub 部分與人工合成的 LexA-VP16 轉(zhuǎn)錄激活因子融合成一個融合蛋白Cub-LexA-VP16。正常條件下 NubG不與Cub 結(jié)合，UBPs 也不能識別分離的泛素，轉(zhuǎn)錄激活因子也不會被切下來。最后，將要檢測的蛋白質(zhì)分別與NubG和Cub融合，形成 bait 融合蛋（bait-cub-LexA -VP16）和 prey 融合蛋白（prey-NubG）。如果 bait 和 prey發(fā)生相互作用，就會促使 NubG 和 Cub 的相互接近，被 UBPs 識別，導(dǎo)致 LexA-VP16 的解離，進(jìn)入核內(nèi)，從而激活報告基因的轉(zhuǎn)錄。 此系統(tǒng)可使用四種Bait質(zhì)粒：pBT3-N，pBT3-SUC，pBT3-STE，pBT3-C，篩選標(biāo)志均為LEU；三種Prey質(zhì)粒：pPR3-C ，pPR3-SUC，pPR3-STE，篩選標(biāo)志均為TRP。NMY51酵母菌株可用YPDA在28℃有氧的條件下培養(yǎng)，然后使用30%的甘油保藏菌種。 |
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供應(yīng)范圍 |
僅供限于科研實驗研究 |
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運輸方式 |
低溫快遞運輸 |
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菌株優(yōu)勢 |
通蔚生物菌株庫擁有200種菌株 , 遺傳性狀一致 |
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特別說明 |
細(xì)胞購買/細(xì)胞培養(yǎng)/動物血清/實驗服務(wù)/原代提取/菌株購買，請立即與通蔚生物聯(lián)系 |
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售后服務(wù) |
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細(xì)胞予重發(fā) |
1.細(xì)胞運輸中遭遇的各種問題，細(xì)胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等，重發(fā)。 |
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2.收到細(xì)胞未開封，如出現(xiàn)污染狀況，重發(fā)。 |
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3.收到細(xì)胞3天內(nèi)，發(fā)現(xiàn)污染問題，經(jīng)核實后，重發(fā)。 |
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4.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置2小時后，干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后，絕大多數(shù)細(xì)胞未存活，經(jīng)核實后，重發(fā)。 |
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5.常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置22小時并且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后，出現(xiàn)污染，經(jīng)核實后，重發(fā)。 |
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6.細(xì)胞活性問題，請在收到產(chǎn)品3天內(nèi)給我們提出真實的實驗結(jié)果，用臺盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力，經(jīng)核實后，重發(fā)。 |
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細(xì)胞不予重發(fā) |
1.客戶操作造成細(xì)胞污染，不重發(fā)。 |
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2.客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。 |
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3.非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好，不重發(fā)。 |
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4.細(xì)胞狀態(tài)不好，未提供真實清晰的培養(yǎng)前3天的細(xì)胞狀態(tài)照片，不重發(fā)。 |
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5.細(xì)胞培養(yǎng)時經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的，不重發(fā)。 |
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6.收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時間證明大于3天的，不重發(fā)。 |
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特別說明 |
上海通蔚生物客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中，有任何技術(shù)問題可以撥打免費服務(wù)電話021-54845833/15800441009，我們隨時給予實驗中的免費解答。 |
