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  • 蘇木素伊紅混合染色液(一步法)

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蘇木素伊紅混合染色液(一步法)

摘要
主要用于細(xì)胞涂片染色,尤其適用婦科細(xì)胞染色和骨髓細(xì)胞染色。

產(chǎn)品介紹
蘇木素伊紅混合染色液(一步法)

產(chǎn)品簡介:
蘇木素
(Hematoxylin)和伊紅(Eosin)聯(lián)合染色,簡稱HE染色,是病理學(xué)常規(guī)制片中基本的染色方法,應(yīng)用極其廣泛。蘇木 精是從原產(chǎn)中南美的洋蘇木中提取出來的淺黃褐色的結(jié)晶,是一種堿性染色劑,它在被氧化后生成蘇木素,同媒染劑(常用的是三價(jià)的鋁或鹽鐵)一起使用,能夠使細(xì)胞核染色。在病理診斷、教學(xué)和科研工作中,常用HE染色對正常組織和病變組織進(jìn)行形態(tài)結(jié)構(gòu)觀察。在HE染色的組織切片中,細(xì)胞核呈藍(lán)色,細(xì)胞漿呈紅色,二者形成鮮明的對比,易于觀察分析。

蘇木素伊紅混合染色液是把
蘇木素和伊紅混合在一起,只需對細(xì)胞、組織等樣本染色一次,既能使蘇木素上色亦可使伊紅上色的新型染色液
可用于染色樣本的類型有石蠟切片、冰凍切片、血液涂片、培養(yǎng)細(xì)胞以及體液涂片
(如宮頸粘液涂片、腦脊液涂片等)等,本產(chǎn)品尤其適用于血液涂片和體液涂片染色。

染色原理:
細(xì)胞核染色的原理:
蘇木素為堿性天 然染料,可使細(xì)胞核著色。細(xì)胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是
DNA,在DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)中,兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外,使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負(fù)電荷,呈酸性,很容易與帶正電荷的蘇木素堿性染料以離子鍵或氫鍵結(jié)合而被染色。蘇木素在堿性溶液中呈藍(lán)色,所以細(xì)胞核被染成藍(lán)色。

細(xì)胞漿染色的原理:
伊紅是一種化學(xué)合成的酸性染料,在一 定條件下可使細(xì)胞漿著色。細(xì)胞漿的主要成分是蛋白質(zhì),為兩性化合物,細(xì)胞漿的染色與染液的
pH值密切相關(guān)。當(dāng)染色液pH值在胞漿蛋白質(zhì)等電點(diǎn)(4.7~5.0)以下時(shí),胞漿蛋白質(zhì)以堿式電離,則細(xì)胞漿帶正電荷,就可被帶負(fù)電荷的酸性染料染色。伊紅在水中離解成帶負(fù)電荷的陰離子,與胞漿蛋白質(zhì)帶正電荷的陽離子結(jié)合,使細(xì)胞漿著色,呈現(xiàn)紅色。

分化作用:
染色后,用某些特定的溶液將組織過多結(jié)合的染色劑脫去,這個(gè)過程稱為分化作用,所用的溶液稱為分化液。在
HE染色中常用1%鹽酸乙醇作為分化液,因酸能破壞蘇木素的醌型結(jié)構(gòu),使組織與色素分離而退色。大多數(shù)組織經(jīng)蘇木素染色后,必須用1%鹽酸乙醇分化,使細(xì)胞核過多結(jié)合的蘇木素染料和細(xì)胞漿吸附的蘇木素染料脫去,再進(jìn)行伊紅染色,才能保證細(xì)胞核與細(xì)胞漿染色的分明。

返藍(lán)作用:
分化之后,蘇木素在酸性條件下處于紅色離子狀態(tài),呈紅色;在堿性條件下處于藍(lán)色離子狀態(tài),呈藍(lán)色。組織切片經(jīng)酸性乙醇分化后呈紅色或粉紅色,立即用水除去組織切片上的酸而中止分化,再用弱堿性水使蘇木素染上的細(xì)胞核呈現(xiàn)藍(lán)色,這個(gè)過程稱為返藍(lán)作用或藍(lán)化作用。另外用自來水浸洗也可使細(xì)胞核返藍(lán),但所需時(shí)間較長。
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