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  • T4 RNA連接酶

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中文名稱 : T4 RNA連接酶 


英文名稱 : T4 RNA Ligase 


分子量 : 43.6kDa,單體


級 別 : BR


來 源 : 含有T4噬菌體克隆基因63的大腸桿菌


濃 度 : 10u/ul 


活性定義 : 是指在37℃、30分鐘內(nèi)將1nmol 5'-[32P]-(A)12-18轉(zhuǎn)化為磷酸酶抗性形式所需的酶量


酶活性分析混合物 : 50mM Tris-HCL(PH7.5), 10mM DTT, 10mM MgCL2, 1mM ATP, 10uM 5'-[32P]-(A)12-18(10uM 5'-末端)


保存液組分 : 20mM Tris-HCL(PH7.5), 50mM KC1, 1mM DTT,0.1mM EDTA,0.5mM ELUGENT變性劑和50%(v/v)甘油


10×反應(yīng)緩沖液 : 500mM HEPES-NaOH(PH8.0,25℃), 100mM MgCL2, 100mM DTT


抑制劑 : 金屬螯合劑、SH基團(tuán)修飾試劑


失 活 : 70℃加熱10分鐘


質(zhì)量控制 : 測試表明無內(nèi)切和外切脫氧核糖核酸酶、核糖核酸酶、磷酸酶污染


備 注 : 反應(yīng)體系中ATP的濃度取決于連接反應(yīng)的類型,推薦的BSA反應(yīng)濃度是0.1mg/ml


性 狀 : 重組酶,催化ATP依賴的分子內(nèi)和分子間磷酸二酯鍵連接(5'-磷酸基團(tuán)和3'-羥基末端),底物分子為多聚核苷酸、寡核苷酸、ssRNA和ssDNA,分子之間的最小的連接底物是核苷3',5'-二磷酸,而分子內(nèi)連接的最小底物是8個(gè)堿基的寡核苷酸。配套提供反應(yīng)緩沖液、ATP和BSA溶液。催化3'→5'磷酸二酯鍵的形成,使核苷酸的5'-磷酸末端和5'-羥基末端連接。作用底物包括單鏈RNA、DNA及二核苷焦磷酸。隨酶提供10X 反應(yīng)緩沖液


用 途 : 生化研究。連接RNA和RNA ;RNA3'-末端標(biāo)記胞嘧啶3',5'-雙[a-32P]磷酸; tRNA的特異性修飾;合成寡核苷酸的環(huán)化;寡聚脫氧核糖核苷酸與單鏈cDNA連接,用于5'RACE(快速擴(kuò)增cDNA末端)分析


保 存 : -20°C


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