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產(chǎn)品中心

  • 人脾外周血單個(gè)核細(xì)胞

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    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號(hào) : TW-CC10244
    • 應(yīng)用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫保存
    • 貨期 : 現(xiàn)貨 , 一周左右
    • 商品庫(kù)存:100
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細(xì)胞信息

細(xì)胞名稱

人脾外周血單個(gè)核細(xì)胞

細(xì)胞品牌

通蔚生物

種屬來源

組織來源

脾臟

生長(zhǎng)特性

少量貼壁生長(zhǎng),大部分懸浮生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)

混合體系細(xì)胞

細(xì)胞簡(jiǎn)介

脾是重要的淋巴器官,有造血、濾血、清除衰老血細(xì)胞及參與免疫反應(yīng)等功能。也是淋巴細(xì)胞遷移和接受抗原刺激后發(fā)生免疫應(yīng)到、產(chǎn)生免疫效應(yīng)分子的重要場(chǎng)所。脾臟作為機(jī)體最大的免疫器官,占全身淋巴組織總量的25%,含有大量的淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,是機(jī)體細(xì)胞免疫和體液免疫的中心,通過多種機(jī)制發(fā)揮抗腫瘤作用. 脾臟切除導(dǎo)致細(xì)胞免疫和體液免疫功能的紊亂,影響腫瘤的發(fā)生和發(fā)展。

質(zhì)量檢測(cè)

不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等

細(xì)胞規(guī)格

5x10?cells/T25或1mL凍存管

培養(yǎng)基

人脾外周血單個(gè)核細(xì)胞專用培養(yǎng)基

培養(yǎng)條件

氣相:95%空氣+5%二氧化碳;溫度:37℃

換液頻率

2-3天換液一次

消化液

0.25%胰蛋白酶

細(xì)胞貨期

7-8周左右

發(fā)貨方式

復(fù)蘇發(fā)貨(免運(yùn)輸費(fèi)用)/  凍存發(fā)貨(需加干冰運(yùn)輸費(fèi)用)

供應(yīng)范圍

僅限于科研實(shí)驗(yàn)使用,絕不可作為動(dòng)物或人類疾病的治療產(chǎn)品使用

特別說明

具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主


細(xì)胞培養(yǎng)操作

收貨處理

取出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)

傳代密度

細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)

傳代比例

首次傳代建議1:2傳代,1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿

傳代方法

 

1. 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次;

2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動(dòng)培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個(gè)培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min;倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化;

3. 用吸管輕輕吹打混勻,按1:2比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補(bǔ)充新鮮的完全培養(yǎng)基至5mL,置于37℃、5%CO2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng);

4. 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察;之后每2-3天換液一次新鮮的完全培養(yǎng)基。


注意事項(xiàng)

重要提醒

1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月。

2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請(qǐng)注意保持無菌操作。

3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時(shí)間不宜過長(zhǎng),否則會(huì)影響細(xì)胞貼壁及其生長(zhǎng)狀態(tài)。

4. 運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請(qǐng)換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的完全培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。

到貨須知

1. 收到細(xì)胞后,首先觀察并拍照記錄細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,干冰運(yùn)輸?shù)募?xì)胞檢查干冰是否完全揮發(fā),細(xì)胞是否解凍,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照(當(dāng)天以及第 2,3 天請(qǐng)拍照),記錄細(xì)胞狀態(tài) (所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。

3. 由于運(yùn)輸?shù)脑?,部分?xì)胞由于溫度變化及劇烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。個(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

4. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。


售后服務(wù)

細(xì)胞予重發(fā)

1. 細(xì)胞運(yùn)輸中遭遇的各種問題,細(xì)胞丟失瓶身破損、培養(yǎng)液嚴(yán)重漏液等,重發(fā)。

2. 收到細(xì)胞未開封,如出現(xiàn)污染狀況,重發(fā)。

3. 收到細(xì)胞3天內(nèi),發(fā)現(xiàn)污染問題,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā)。

4. 常溫發(fā)貨細(xì)胞靜置2小時(shí)后,干冰凍存發(fā)貨細(xì)胞復(fù)蘇2天后,絕大多數(shù)細(xì)胞未存活,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā)。

5. 常溫發(fā)貨的細(xì)胞靜置22小時(shí)且未開封或干冰凍存發(fā)貨的細(xì)胞復(fù)蘇2天后,出現(xiàn)污染經(jīng)核實(shí)后,重發(fā)。

6. 細(xì)胞活性問題在收到產(chǎn)品3天內(nèi)提出真實(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果,用臺(tái)盼藍(lán)染色法鑒定細(xì)胞活力,經(jīng)核實(shí)后,重發(fā)

細(xì)胞不予重發(fā)

1. 客戶操作造成細(xì)胞污染,不重發(fā)。

2. 客戶嚴(yán)重操作失誤致細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。

3. 非我們推薦細(xì)胞培養(yǎng)體系致的細(xì)胞狀態(tài)不好,不重發(fā)。

4. 細(xì)胞狀態(tài)不好,未提供真實(shí)清晰的培養(yǎng)前3天的細(xì)胞狀態(tài)照片,不重發(fā)

5. 細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)經(jīng)其它處理導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題的,不重發(fā)。

6. 收到細(xì)胞發(fā)現(xiàn)問題與客服人員溝通的時(shí)間證明大于3天的,不重發(fā)。

特別說明

上海通蔚生物客戶在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,有任何技術(shù)問題可以撥打免費(fèi)服務(wù)電話021-54845833或15800441009,我們隨時(shí)給予實(shí)驗(yàn)中的免費(fèi)解答。

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