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品質保證 · 通蔚試劑

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產品中心

  • 氣單胞菌通用PCR試劑盒

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    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號 : TW36518
    • 應用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫/避光保存
    • 貨期 : 現貨
    • 商品庫存:100
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氣單胞菌通用PCR試劑盒
產品及特點:
氣單胞菌屬(Aeromonas spp.)屬于氣單胞菌科,廣泛分布于自然界,可從水源、土壤以及人的糞便中分離,引起的疾病廣泛存在于哺乳動物(如人、鳥類等)和冷血動物(如鮭、魚、蛇等)中。在人類主要引起腸內感染和腸外感染,前者主要表現為胃腸炎,患者通常呈癥狀較輕的水樣腹瀉,癥狀嚴重,呈血性糞便且便中有大量白細胞者(和志賀菌引起的痢疾很相似)較少見,本菌是夏季腹瀉的常見病原菌之一,主要致病物質為溶血毒素和細胞毒素;后者包括敗血癥、傷口、眼、關節(jié)、腹腔內及其他感染,主要與外傷后傷口接觸了污染的水有關。因此快速靈敏檢測氣單胞菌具有重要的意義,本試劑盒就是為此目的根據 PCR 原理開發(fā),它具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供DNA模板。
2. 引物經過精心優(yōu)化,專一性強,只擴增氣單胞菌通用,與其他病原沒有交叉反應。
3. 提供陽性對照,便于區(qū)分假陰性樣品。
4. PCR mix 中含上樣染料,PCR后可以直接上樣電泳。
5. 本試劑盒足夠做40μL體系的PCR 50次,但只能用于科研。
規(guī)格及成分:

編號

成分

規(guī)格

試劑一

PCR MagicMix 3.0

1 mL(紅蓋)

試劑二

超純水

1 mL(亮黃色)

試劑三

氣單胞菌通用 PCR 引物混合液

100 μL(白蓋)

試劑四

氣單胞菌通用 PCR 陽性對照(1×10E8 /μL)

50 μL(黃蓋)

試劑五

使用手冊

1 份

運輸及保存:
低溫運輸,-20℃保存,保存期限為一年。陽性對照需要單獨放置,不要污染其他試劑。
自備試劑:
樣品 RNA。
使用方法:
一、樣品 DNA 的制備:
1. 用自選方法純化N+2個樣品的DNA,本試劑盒跟市場上大多數核酸提取試劑盒兼容??梢赃x用本公司柱式病毒 DNAout。
2. 如果有N個樣品,則需要做N+2個提取,包括一個樣品制備陽性對照和一個樣品制備陰性對照。樣品制備陽性對照是在適量水(取決于試劑盒要求的樣品起始量)中加10μL氣單胞菌通用PCR陽性對照的 1000 倍稀釋液而得,樣品制備陰性對照是直接用水。提取結束后得到模板 DNA 放冰上待用。
二、設置 PCR 反應(40μL 體系):
3. 對N+2個樣品,在PCR時需要增加一個PCR陽性對照和一個PCR陰性對照,故需要設置N+4個反應。在N+4個PCR管中分別加入下列成分:

成份

N+2 個樣品管

PCR 陰性對照

PCR陽性對照

PCR Magic Mix 3.0

20μL

20μL

20μL

氣單胞菌通用PCR 引物混合液

2μL

2μL

2μL

N+2個樣品DNA模板

18μL

--

--

PCR 陰性對照(水)

--

18μL

--

PCR 陽性對照(氣單胞菌通用PCR陽性對照1000倍稀釋液)

--

--

18μL

4. 按下表設置 PCR 反應:

過程

溫度

時間

預變性

95℃

5 min

PCR 反應35個循環(huán)

95℃

30 sec

55℃

30 sec

72℃

40 sec

延伸

72℃

7 min

三、電泳檢測:
5. 取 10-20 μL PCR 產物。電泳檢測 PCR 產物。本產品提供的 PCR Mix 在 擴增結束后可以直接上樣,不需要另外再加 loading buffer。PCR 產物陽 性對照必須有 551bp 大小的條帶出現,陰性對照必須無任何擴增,否則實 驗無效。對沒有擴增產物的樣品,可以稀釋 10 倍后重復 PCR 擴增以排除 PCR 抑制劑的感染。
四、特別提示:
本公司的所有產品,僅可用于科研實驗,嚴禁用于臨床醫(yī)療及其他非科研用途!
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