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RKO-E6人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞
基本信息
產(chǎn)品品牌 ：通蔚生物
中文名稱 ：人結(jié)腸癌轉(zhuǎn)基因細(xì)胞
細(xì)胞簡(jiǎn)稱 ：RKO -E6
細(xì)胞形態(tài) ：上皮細(xì)胞樣
生長(zhǎng)特性 ：貼壁細(xì)胞
培養(yǎng)環(huán)境 ：空氣，95% ；CO2，5% 37℃
凍存條件 ：55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基+40% FBS+5% D M SO液氮
完全培養(yǎng)基 ：M EM （含N EA A ）(PM 150410)＋10% F B S(164210-50)＋1%P /S(P B 180120)
傳代步驟
1、吸出原培養(yǎng)液。
2、加入2ml左右PBS，輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶潤(rùn)洗細(xì)胞,吸出PBS丟棄。
3、加入1ml左右0.25% 胰蛋白酶溶液（含ED TA ），輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶使之浸潤(rùn)所有細(xì)胞。
4、放入培養(yǎng)箱消化，顯微鏡下看到細(xì)胞塊中間的細(xì)胞明顯變圓有間隙時(shí)可終止，全程不要拍打培養(yǎng)瓶。
5、加入3ml含血清的培養(yǎng)基終止消化，吹打細(xì)胞使之脫壁并在液體里反復(fù)吹打使細(xì)胞盡量呈單顆細(xì)胞的懸浮液。
6、收集細(xì)胞懸液離心，1200rpm /min 3分鐘，離心完吸出上清丟棄。
7、加入新鮮培養(yǎng)基，吹打幾下混勻細(xì)胞即可，按比例接種到新培養(yǎng)瓶，補(bǔ)足培養(yǎng)基，擰松瓶蓋或使用透氣瓶蓋進(jìn)行培養(yǎng)。
消化時(shí)間 ：1~ 2分鐘
換液頻次 ：2~ 3次/周
傳代比例（密度） ：1:3-1:4
細(xì)胞背景描述
RK O -E6細(xì)胞是用脂質(zhì)體法轉(zhuǎn)染pC M V -E6的結(jié)腸癌RK O 細(xì)胞系。RKO -E 6細(xì)胞含有穩(wěn)定整合受控於巨細(xì)胞病毒啟動(dòng)子的人乳頭狀病毒(HPV )E6癌基因，R K O -E6細(xì)胞和它的母系R K O 一起可用于研究p53缺失引起的細(xì)胞參數(shù)改變p53介導(dǎo)的轉(zhuǎn)錄和凋亡等。
組織來(lái)源 ：結(jié)腸癌，轉(zhuǎn)染插入到pC M V中的H PVE6
細(xì)胞類型 ：腫瘤細(xì)胞
腫瘤類型 ：腸癌細(xì)胞
生物安全等級(jí) ：2 [C ontainsH PV6and CM V viralseq u en ces]
細(xì)胞保藏中心 ：ATCC；C R L-2578
收到常溫細(xì)胞后如何處理
細(xì)胞培養(yǎng)詳細(xì)操作步驟請(qǐng)參照通蔚生物細(xì)胞培養(yǎng)操作指南
1. 收到常溫細(xì)胞后，及時(shí)拍照記錄有無(wú)漏液/瓶身破損現(xiàn)象。
2. 用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋，將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí)，以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū)，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如貼壁特性（貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4. 靜置完成后，取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，鏡檢、拍照，記錄細(xì)胞狀態(tài)（所拍照片 將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù)）；建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后，定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5. 若觀察到異常或者對(duì)細(xì)胞有疑問(wèn)，請(qǐng)及時(shí)跟我們聯(lián)系；對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)操作及培養(yǎng)?？筛覀兊募夹g(shù)支持交流。
