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品質(zhì)保證 · 通蔚試劑

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產(chǎn)品中心

  • 小鼠晶狀體上皮細(xì)胞

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    • 品牌 : 通蔚生物
    • 目錄號 : TW33572
    • 應(yīng)用 : 僅供科研使用
    • 保存條件 : 低溫保存
    • 貨期 : 現(xiàn)貨
    • 商品庫存:100
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產(chǎn)品簡介
產(chǎn)品名稱 :小鼠晶狀體上皮細(xì)胞
產(chǎn)品品牌 :通蔚生物
組織來源 :晶狀體組織
產(chǎn)品規(guī)格 :5×105cells/T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡介
小鼠晶狀體上皮細(xì)胞分離自晶狀體組織。晶狀體源自胚胎發(fā)育外胚層,僅含有上皮細(xì)胞及其產(chǎn)物,晶狀體囊膜作為屏障將晶狀體與其它類型細(xì)胞完全分開。因而,晶狀體上皮細(xì)胞培養(yǎng)既無神經(jīng)和血管組織的干擾,又不受其它類型細(xì)胞如成纖維細(xì)胞的污染,保證了培養(yǎng)中細(xì)胞成分的單一性。
晶狀體上皮細(xì)胞主要負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)晶狀體的生理平衡,包括電解質(zhì)和液體的輸送。在正常的發(fā)育過程中,晶狀體上皮細(xì)胞分化和成熟,然后遷移到晶狀體內(nèi)部,產(chǎn)生晶體蛋白,自身也拉長而變成晶狀體纖維細(xì)胞,并最終失去細(xì)胞核和其它的細(xì)胞器。

研究表明,晶狀體上皮細(xì)胞的分化和極化受到了眼部液體中的生長因子的調(diào)控,包括表皮生長因子和胰島素等。細(xì)胞貼壁后為扁平不規(guī)則多角形,呈單層生長、連成膜狀。
晶狀體上皮細(xì)胞是緊密貼附于晶狀體前囊內(nèi)表面的單層上皮細(xì)胞,其異常增殖和分化與白內(nèi)障和后囊混濁的發(fā)生密切相關(guān),體外培養(yǎng)是研究其生長規(guī)律的主要手段。

方法簡介
通蔚生物實驗室分離的小鼠晶狀體上皮細(xì)胞采用胰蛋白酶-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。

質(zhì)量檢測
通蔚生物實驗室分離的小鼠晶狀體上皮細(xì)胞經(jīng)BFSP2(晶狀體蛋白) 免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90% 以上,且不含有H IV -1、H BV 、H C V 、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息
包被條件 :鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm 2) 
培 養(yǎng)  基 :含F(xiàn)BS、生長添加劑、Penicillin、Streptom ycin等
換液頻率 :每2-3天換液一次
生長特性 :貼壁 
細(xì)胞形態(tài) :上皮細(xì)胞樣 
傳代特性 :可傳1-2代 
傳代比例 :1:2
消 化  液 :0. 25% 胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 :氣相 :空氣,95% 。C O2,5%
小鼠晶狀體上皮細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限。建議使用通蔚生物配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的最佳培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)
發(fā)貨時發(fā)送細(xì)胞電子版照片

使用方法
小鼠晶狀體上皮細(xì)胞是一種貼壁細(xì)胞,細(xì)胞形態(tài)呈上皮細(xì)胞樣,在通蔚生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)操作流程下,細(xì)胞可傳1-2代。建議您收到細(xì)胞后盡快進(jìn)行相關(guān)實驗。
客戶收到細(xì)胞后,請按照以下方法進(jìn)行操作。
1. 取出T 25細(xì)胞培養(yǎng)瓶,用75% 酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置3-4h,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
2. 貼壁細(xì)胞消化
1) 吸出T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基,用PBS清洗細(xì)胞一次。
2) 添加0. 25% 胰蛋白酶消化液1m L至T 25培養(yǎng)瓶中,輕微轉(zhuǎn)動培養(yǎng)瓶至消化液覆蓋整個培養(yǎng)瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃溫浴1-3min。倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后,再加入5ml完全培養(yǎng)基終止消化。
3) 用吸管輕輕吹打混勻,按傳代比例接種T25培養(yǎng)瓶傳代,然后補充新鮮的完全培養(yǎng)基至5m L,置于37℃、5% C O 2、飽和濕度的細(xì)胞培養(yǎng)箱中靜置培養(yǎng)。
4) 待細(xì)胞完全貼壁后,培養(yǎng)觀察。之后按照換液頻率更換新鮮的完全培養(yǎng)基。
3. 細(xì)胞實驗
因原代細(xì)胞貼壁特殊性,貼壁的原代細(xì)胞在消化后轉(zhuǎn)移至其他實驗器皿(如玻璃爬片、培養(yǎng)板、共聚焦培養(yǎng)皿等)時,需要對實驗器皿進(jìn)行包被,以增強細(xì)胞貼壁性,避免細(xì)胞因沒貼好影響實驗。包被條件常選用鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2) ,多聚賴氨酸PLL(0. 1m g/m l),明膠(0. 1% ),依據(jù)細(xì)胞種類而定。懸浮/半懸浮細(xì)胞無需包被。

注意事項
1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
2. 在細(xì)胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細(xì)胞貼壁及其生長狀態(tài)。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天每個倍數(shù)各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和通蔚生物技術(shù)部溝通。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,詳盡告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤、回訪直至問題得到解決。

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